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易哈佛
\ (综合)省时备考知识点36条
简介(试读内容):
1.生物素标记蛋白质的注意事项包括:①根据抗原或抗体分子结构中所带可标记基团的种类以及分子的理化性质,选择相应的活化生物素和反应条件;②标记反应时,活化生物素与待标记抗原或抗体应有适当比例;③为了减少空间位阻影响可在生物素与被标记物之间加入交联臂样结构;④生物素与抗原、抗体等蛋白质结合后不影响后者的免疫活性;标记酶时则结果有不同。
2.胶体金的制备一般采用还原法,常用的还原剂有枸橼酸钠、鞣酸、维生素C、白磷、硼氢化钠等。
3.用于穿流法的膜一般选择0.4μm的孔径,用于横流法的膜一般选择5至10μm的孔径,对蛋白质的结合力强,膜的均一性要良好,以保证试剂批内的均一性。
4.斑点酶免疫吸附试验的优点为:NC膜吸附蛋白力强,微量抗原吸附完全,故检出灵敏度较普通ELISA高6~8倍;试剂用量较ELISA节约约10倍;操作简单,实验及结果判读不需特殊设备条件,吸附抗原(抗体)或已有结果的NC膜可长期保存,不影响其活性。
5.酶免疫组化染色中最常用的酶是辣根过氧化物酶(HRP)。
6.荧光免疫组织化学染色技术应用包括:自身免疫性疾病、细菌和病毒的快速鉴定、寄生虫的检测与研究等。癌基因蛋白的检测常用酶免疫组织化学技术。
7.目前免疫细胞的检测主要采取流式细胞分析法,结果客观准确,重复性好。
8.淋巴细胞活力的表示用活细胞占总细胞的百分比来表示。
9.液氮深低温(-196℃)能长期保存分离细胞,需加入二甲亚砜作为保护剂。
10.酶联免疫斑点试验是一种既可检测抗体分泌细胞,又可检测抗体分泌量的方法。